Protein Biology

Co NTA Beads

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General Information

產品介紹

Co NTA Beads 可以從原核和真核表達系統中一步純化 His 標籤蛋白。該產品是以 4%瓊脂糖凝膠為基質,配體以四配位鍵螯合鈷。Co NTA Beads 相比 Ni NTA Beads His 標籤蛋白具有更高的選擇性。具體性能見表 1

1. Co NTA Beads 的產品性能

項目

性能

基質

4%瓊脂糖凝膠

螯合離子

Co2+

載量(/mL 基質)

>20mg 6His-tagged protein

微球粒徑(μm

45–165

最大壓力

0.1 MPa, 1 bar

儲存緩衝液

20% 乙醇的 1XPBS

儲存溫度

4°C-30°C

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Co NTA Beads 可以耐受一定範圍的變性劑和其他的添加劑,如表 2

2. Co NTA Beads 試劑耐受情況

試劑種類

濃度

還原劑

10 mM β-mercaptoethanol1

變性劑

8 M urea

6 M Gua-HCl

去汙劑

1% Triton™ X-100 1% NP-40

1% CHAPS ,SDS, sarcosyl

其他類

500 mM imidazole at pH7.0 to 8.0 for elution

30% ethanol2

20% glycerol

500 mM KCl

1.0 M NaCl

20mM MES

50 mM Tris3

50 mM HEPES

50 mM MOPS

Note: 1 Co NTA Beads 6FF 立即用平衡液平衡,否則介質會變色。不要將介質保存在含

β-Mercaptoethanol 的緩衝液中。

2 過高濃度的咪唑有可能會降低蛋白回收率。

3 乙醇有可能造成蛋白沉澱,降低蛋白回收率和堵柱子。

4 Tris 與金屬離子微弱結合造成載量降低。

避免使用下列試劑DTT (dithiothreitol), DTE (dithioerythritol) and TCEP (TRIS (2-carboxyethyl) phosphine).會降低介質的蛋白載量。

EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid) EGTA (ethylene Glycolbis ([β-amino-ethyl ether])會將鈷離子從介質上剝落。

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