西方點墨實驗 (Western Blot),又稱免疫墨點法 (Immunoblot) ,利用抗體與蛋白質專一性的結合,分析各式樣本中(組織、細胞、體液)目標蛋白質是否表現(定性)以及表現情況(定量)。

 

ACE Biolabs 提供Western Blotting 的服務包含

1. 蛋白質萃取 (Protein Extraction ) : 根據客戶樣本種類,提供蛋白質萃取優化服務。

2. 蛋白質定量 (Protein Assay ) : BCA 或是 Bradford protein assay 兩種常用蛋白質定量方式,測定蛋白質濃度。

3. 蛋白質電泳 (SDS-PAGE) : 依客戶蛋白質大小需求,可選擇 8%-15% Acrylamide gel 進行蛋白質分離。

4. 蛋白質染色 (Protein Staining) : 使用 QuickBlue Protein Gel Staining 快速蛋白染色方式。

5. 免疫轉漬 (Transfer) : 濕式轉膜後以Ponceau S 進行膜上的總蛋白染色。

6. 西方點墨實驗 (Western Blot) :

a. 由客戶提供一抗,或是使用 ACE Biolabs Antibody 進行實驗。

b. 由客戶選擇 Loading Control。可參考 Loading control指南

c. 由客戶指定上樣順序。

d. 預設使用 Protein-Free Blocking Buffer,獲取高訊號低背景的結果。

d. 若實驗條件許可,提供 Stripping,重上一級抗體的服務,節省樣品使用量。

 

Western Blot 服務流程

1. 填寫服務委託書,初步溝通了解需求。

2. 確立接案後,請客戶將WB服務委託單正本與樣品,寄送至實驗室。

建議一般蛋白提供50ug/well,磷酸化蛋白100ug/well (未經sample buffer處理 )。另外,如果有Positive/Negative control 也可以一併提供。

3. 收到樣品後,會告知您預計實驗排程。

4. 實驗完成後,交付結案報告一份 ( 包含照片原始檔案 ) 、轉漬膜 (依客戶需求提供)

 

填寫 Western Blot 委託服務單

 與我們聯絡了解WB客製化服務 

電話 : 03-2870051    

email : order@acebiolab.com

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